反相色譜法為什麼不用加純水

❶ 液相色譜裡面能只用水做流動相嗎

這個得看你的色譜柱。
一般的反相色譜柱不耐純水。如果用的話會特別費。專
我當初做過屬一個實驗，流動相是0.025mol/L的KH2PO4，色譜柱是C18柱，大概半個月換一根吧。
特殊的色譜柱可以耐受純水，但是可能分離效果不好，峰型也不一定好。

另外，純水很 容 易 長微生物。一般純凈水開瓶之後在25℃放置1天，過濾的速度就會緩慢，放三天就渾濁了。如果你的流動相是純水，那麼系統、色譜柱很容易堵塞。所以不建議使用。

❷ 苯基鍵合硅膠色譜柱柱為什麼不能用純水沖洗

這個問題比較難回答。因為注意的東西比較多，比如：
首先是色譜柱的方向問題。大多數色譜柱會標明方向。這個傻子都知道，安裝的時候要順著方向安裝。不過也有一些色譜柱沒有方向，這些是雙相填料的色譜柱。第一次使用時的方向就是它的方向。不過所有的色譜柱都是，一旦開始使用，就不要轉換方向。這樣會損毀色譜柱。
第二個是柱壓問題。一般的色譜柱壓力最好不要超過20MPa，壓力過高會加速損毀色譜柱。
第三，柱溫。色譜柱溫度最好不要超過45℃。也是會加速損毀色譜柱。
還有pH值。色譜柱的pH值范圍是不同的。大多數色譜柱的pH值范圍是4-7左右。有些偏向酸性，有些偏向鹼性的，還有一些pH值廣泛的。這些按照說明書操作即可。

除此之外，色譜柱還有別的一些需要注意的事情。
首先，鍵合硅膠色譜柱分成幾種。比如C18、C8、苯基柱這些的使用方法都差不多。是反相色譜柱。它們的流動相中還有大量的水，還有無機鹽。這個時候需要注意，無機鹽是不能夠長時間留在色譜柱裡面的。色譜柱最好保存在純甲醇或者純乙腈裡面。但是無機鹽不能溶於純甲醇或者純乙腈。所以中間要過渡甲醇水或者乙腈水。
而有些色譜柱比較特殊，比如氨基柱、氰基柱。他們是可以用於正相，也可以用於反相。所以使用的時候注意區分。配置流動相的時候也避免使用大量的水相。

其他的暫時想不到。或者說你想問的問題可以提出來，大家討論討論。

❸ 何謂正相色譜和反相色譜在應用上有什麼特點

1、正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜，其柱填料是吸附劑，其表面上分布有活性吸附位點，溶劑和溶質分子均能被吸附於活性位點上。由於相互作用力有大有小，溶劑分子與溶質分子、溶質分子相互之間又存在競爭吸附，從而造成了在柱內保留時間的差異，使不同物質得到分離。

應用特點：正相色譜一般用來分離中性化合物和離子(或可電離的)化合物，而且以中性樣品為主。適於分離樣品如下：

①對於反相色譜法很難分離的異構體，可以採用以硅膠為固定相的正相色譜分離分析；

②根據被分離樣品極性差別進行族類分離；

③易於水解樣品的分離分析；

④分離分析高脂溶性樣品，其在極性有機溶劑中溶解度很小；

⑤正相色譜也可以用於異構體分離(包括幾何異構體和光學異構體)。

2、流渣叢動相極性大於固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛，現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。反相介質性能穩定。分離效率高，可分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸等含有非極性基團的各種物質。

應用特點：反相介質性能穩定。分離效率高，可分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸、甾類、脂類、脂肪酸、糖類、植物鹼等含有非極性基團的各種物如遲櫻質。

(3)反相色譜法為什麼不用加純水擴展閱讀

原理：

反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據溶質極性(疏水性)的差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。

與HIC一樣，RPC中溶質也通過疏水性相互作用分配於固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非極性基團所覆蓋，表現出強烈的疏水性。因此，必須用極性有機溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進行溶質的洗脫分離。

溶質在反相介質上的分配系數取決於溶質的疏水性，一般疏水性越大，分配系數越大。當固定相一定時，可以通過調節流動相的組成調整溶質的分配系數。

RPC主要應用於相對分子質量低於5000，特別是1000以下的非極性小分子物質的分析和純化，也可以用於蛋白質等生物大分子的分析和純化。

由於反相介質表面為強烈疏水性旦仔，並且流動相為低極性的有機溶劑，生物活性大分子在RPC分離過程中容易變性失活，所以，以回收生物活性蛋白質為目的時，應注意選用適宜的反相介質。

❹ 反相硅膠柱色譜為什麼不直接採用去離子水裝柱

會造成硅膠填料的破壞。色譜柱由高壓勻漿法裝填，絕塌能並哪圓承受較高壓力。為獲得最佳分離效果，使用時請不要超過緩扮200kgf，而且避免壓力突然上升或變化，否則會造成硅膠填料的破壞，減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外最高操作溫度不要超過60℃。

❺ 反相柱層析分離皂苷以甲醇水為洗脫劑為什麼

反相柱層析分離皂苷，以甲醇水為洗脫劑時悄坦，甲醇的比例增大，洗脫能力增強雀瞎。
因為水的極性最高，甲醇也是強極性的，如果你是做反相色譜（流動相極性強於固定相）通常就是用甲醇和水做流動相，如果是正相色譜可以使用極性較低的溶劑頃運空，如乙酸乙酯、苯之類的，一般來講液相色譜法大多數是反相色譜，所以使用甲醇水做流動相很常見，流動相可以100%的甲醇，但是沒辦法100%的水，因為純水做流動相壓力過大，儀器承受不住。

❻ 反相硅膠柱色譜為什麼不直接採用去離子水裝柱

出現殘留物。反相硅膠是在正相硅膠的基礎上進行化學反應把OH取代為OR的硅膠。反相硅膠柱色譜因在使用離子水柱時會出現殘留物，不直接採用去離子水裝柱。一般色譜柱的材質不允許長時間被純水沖洗。

❼ 碳十八色譜柱能進水嗎

可以。不知道你說的「進水」是用水做流動相還是用水作為樣品，不過都是版可以的。
C18是最常見的反相色譜柱權。反相的色譜柱都是可以用水作為流動相的。
不過一般來說，至少要有10%的有機相，也就是流動相里最好加入至少10%的甲醇或者乙腈。也有色譜柱的廠家說可以耐受100%的純水相，不過如果用100%的水作為流動相，對色譜柱和的損傷有點大，會減少壽命。

樣品進水溶液就更沒有問題了，流動相那麼大體積的水溶液都可以進柱子，進樣不過幾微升的體積而已，當然也是可以的。

❽ 反相與正相色譜法有何區別

反相還是正相，是根據流動相相對於固定相的極性而言的。 流動相極性強於固定相的，稱作反相色譜；流動相極性弱於固定相的，稱作正相色譜。

反相色譜流動相的極性強，容易帶著極性分子走，而留下非極性分子。這主要用於非極性樣品的分離。常用的高壓液相色譜都是這種，也有人喜歡說反相液相色譜，其實是一個意思，就是顯得博學一點。
正相色譜固定相極性強，容易把極性分子留下，故主要用於極性樣品的分離。如離子色譜。

實際應用好像沒有太注意正相還是反相，倒是都很注意柱子能承受什麼樣極性的物質。反相液相色譜柱不可以用強極性的純水，都是要加入至少5%的有機溶劑來弱化水的極性。 正相的離子色譜柱則堅決不可以進入有機物質。但是氣相色譜實際也是一種正相色譜，卻往往要求不可以有水進入。

❾ 為什麼普通C18色譜柱不能用純水沖洗

容易引起疏水坍塌，把強保留物質沖出來，會毀了柱子的，所以水相不能超過95%，最開始的梯度淋洗也是高有機相到高水相，但是不是純水相。

❿ 在沖洗高效液相C18反相柱的時候，為什麼不能用純水

相C18色譜柱（即憎水柱子）如果用純水沖洗後，如果立即停泵則由於其憎水（疏水專）的緣故使得柱子內屬的水因而流失掉，長時間停泵使得柱子幹掉（變干），會造成柱子內固定相填料表面鍵合的硅烷基結構塌陷（也說成是失去支撐倒下），柱子就這樣報廢了。那麼一旦沖洗柱子用了純水相怎麼辦呢？誒！不要驚慌，只要你不停泵，上述情況不會立即發生，我們只要保證最後用有機相沖洗柱子，停泵後使柱子內留存的是有機相，就無大礙，