純水低流速沖色譜柱會有什麼傷害

1. 純水是否能通過高效液相色譜柱

看是什麼柱子，有一些做糖的柱子就是要求純水做流動相的。但一般的C8或C18柱子不行，要求最少5%有機相，以防對色譜柱傷害

2. 離子色譜柱能用純水沖洗嗎，這樣是否會影響柱子的性能。

按看說明書或咨詢色譜柱廠商，防止損害色譜柱，離子柱都不便宜，小心為上。
用純水短時間內沖洗色譜柱，通常不會對色譜柱造成較大的損傷，但如果長時間用水沖洗色譜柱則
可能引起固定相流失和相塌陷現象，所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱，建議在水中加入一定
量的甲醇或乙腈進行沖洗，通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析：
首先，由於目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質，硅膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一
定濃度有機溶劑的流動相中要大得多，所以長時間的用純水沖洗會導致固定相的流失，引起柱效下降。
其次，對於常規的 C18 柱而言，由於C18 長鏈與水是不互溶的，C18 長鏈之間的相互作用力大於
C18 與水分子的作用力，長時間的用水沖洗，使得C18 長鏈之間相互靠近，水流的沖刷，導致相互聯結
的C18 長鏈倒伏在硅膠基質的表面，對疏水性物質的保留能力下降，即相塌陷。針對用純水沖洗容易出
現相塌陷的現象，有些廠家推出了純水柱（如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱），這種純水柱可以用純
水作流動相而不會產生相塌陷，這對只溶於純水的樣品的分析提供了一個很好的選擇。
第三，如使用過含緩沖鹽的流動相的色譜柱，用純水沖洗，並一定能將緩沖鹽完全洗去。因為，由
於緩沖鹽難溶於有機溶劑，C18 反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的C18 長鏈，相當於一
個疏水的有機相，而硅膠基體被有機物質包裹著，所以用純緩沖鹽水溶液做流動相時也許緩沖鹽不容易
到達硅膠基質，不至損害基體。但所用的流動相通常會含一部分有機溶劑，而且這些有機溶劑與C18
長鏈是互溶的，因此有機溶劑的加入增強了流動相滲入硅膠基質的能力，能使部分緩沖鹽達到硅膠基質。
同樣的道理，用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽，而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那裡。所以最好在
水中加入部分有機溶劑進行沖洗，一般的C18 柱通常用含水20％～90％都可以，含水的比例要視分析
時使用的流動相來定，原則上，用於沖洗的流動相中水的比例應該等於或高於（緩沖鹽用後清洗的情況，
推薦使用「等於」）分析時所用流動相中水的比例。

3. 液相色譜可以用100%水沖嗎，我的色譜柱不小心用純水沖了10分鍾左右，然後壓力就上不去了，我該怎

如果流動相里本來就有水 短時間內沒問題 切成流動相多沖一會兒就沒事了

4. 洗柱用水沖的時間長了對色譜柱有沒有影響

首先你的柱子是反相柱，最好不要用純水沖洗柱子，可以用5-10%甲醇水溶液小流速沖洗色譜柱，時間長一點，基本是沒有什麼大礙的，我們經常過夜沖柱子，最後保存在100%的甲醇里。

5. 柱子堵了,為什麼要用低流速沖

因為沖洗的時候可以將柱溫略微設高一點，有利於鹽溶解，或是先用100%水沖（只能短時間沖，二三十分鍾，時間長會損壞柱子），再用含有機相的水沖。如果是長時間走樣，樣品中的固體小顆粒堵了柱子，也只能反沖了。

有些柱子反沖之後就只能倒過來用了，所以需謹慎，最好打電話咨詢下工程師（最好平時使用時加上保護柱，相對於色譜柱，濾芯還是便宜很多的）。

相關知識

作為普通C18柱，尤其是硅膠基質的普通C18柱，對酸鹼鹽以及水，都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多（除了帶AQ的純水柱，一般各家品牌都有這款防水柱）我個人認為只要超過80%的水的流動相，都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。

酸對柱子的損傷是不可逆的，一定要控制PH，PH在2以下的都要做好費柱子的准備。鹼性條件是對於硅膠基質的C18的弱項，一般的硅膠基質的C18鹼性條件都不太耐用，但現在也有鹼性PH11的柱子，但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的，而且是致命。

以上內容參考：網路--柱子

6. 做液相流速5.0ml/min會沖壞柱子嗎

5.0ml/min的流速算是相當大了。一般最高也就是2.0ml/min。不過還要看色譜柱的粒徑和流動相。反正是不建議這么大的流速的。就像是水流湍急的河岸泥沙會被水流沖掉一樣，填料會加速塌陷的（這個比喻不太恰當）。

當然了，如果真的需要這樣的柱流速也不是完全不可以。還要看柱子的柱壓力。一般的色譜柱都會有一個上限的壓力值。這么說吧，如果是一般的C18色譜柱250mm柱壓最好不要超過20MPa，不然壽命就會大大縮短。苯基柱、氨基柱、C8柱子也是一樣的。如果你用的是特殊的色譜柱就另當別論了。

7. 色譜柱能否用純水沖洗沖洗後會有什麼樣的影響

如果流動相里本來就有水 短時間內沒問題 切成流動相多沖一會兒就沒事了

8. 液相色譜C18柱堵塞後如何沖洗柱子，能用純水 沖柱子嗎

C18柱子不能用純抄水沖洗，再說本來就堵了，壓力很高應該選擇壓力低的溶劑。
如果你確定是堵塞了，就用純乙腈反沖，先用低一點的流速，比如01ml/min，看壓力情況，不要超過200bar，再慢慢提高流速，但不要超過1.的流速，如果是真的堵了，可能會壓力慢慢降下來的。
如果上面方法不行，那還有可能是鹽析堵的，那就用乙腈：水=90：10反沖。

9. 每次使用之後的高效液相色譜柱都要清洗嗎，如何沖洗

這個是不是需要清洗的問題，需要看你的流動相是什麼。
一般反相色譜，經常會用到緩沖鹽。而鹽對於色譜柱傷害比較大。如果鹽堵在色譜柱裡面那柱子就廢了。所以需要把它沖掉。最好是每次都沖掉。
如果你的柱子流動相裡面沒有鹽，那就沒必要沖洗了。

沖洗方法：反相柱子最好保存在純甲醇或者純乙腈裡面，但是鹽不溶於純有機相。所以中間過渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什麼，要看你的流動相。
比如，我用的是磷酸鹽緩沖液-乙腈（70：30）的流動相，那麼沖洗的時候最好選用10%-15%乙腈水，沖洗1.0ml/min，至少30min，最好40min。

如果第二天接著使用的話可以不必用純甲醇或者純乙腈封存了。如果第二天不用，最好用純的有機相封上柱子，同樣是1.0ml/min流速沖洗30min。

另，也不是說不清洗就會壞。我們研發有的時候為了趕項目，來不及沖洗色譜柱。柱子不會怎麼樣。就是壽命會短一點而已。

10. 液相色譜法實驗前為什麼要沖洗色譜柱

轉載：《分析測試網路網》

1.色譜柱簡介
最常用的色譜柱填充劑為化學鍵合硅膠。反相色譜系統使用非極性添充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠（如氰基硅烷鍵合相和氨基硅烷鍵合相等）也有使用,正相色譜系統使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換填充劑用於離子交換色譜；凝膠或高分子多孔微球等填充劑用於分子排阻色譜；手性鍵合填充劑用於對映異構體的拆分分析。
填充劑的性能（如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團的表面覆蓋度、含炭量和鍵合類型等）以及色譜柱的填充，直接影響待測物的保留行為和分離效果。孔徑在15nm（1nm=10埃）以下的填料適合於分析分子量小於2000的化合物，分子量大於2000的化合物則應選擇孔徑在30nm以上的填料。以硅膠為載體的一般鍵合固定相填充劑適用PH2~8的流動相。當PH大於8時，可使載體硅膠溶解；當PH小於2時，與硅膠相連的化學鍵合相易水解脫落。當色譜系統中需使用PH大於8的流動相時，應選用耐鹼的填充劑，如採用高純硅膠為載體並具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠、包裹聚合物填充劑、有機-無機雜化填充劑或非硅膠填充劑等；當需使用PH小於2的流動相時，應選用耐酸的填充劑，如具有大體積側鏈能產生空間位阻保護作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠、有機-無機雜化填充劑等。
2.色譜柱的沖洗體積確定
一般情況都是沖洗色譜柱10-20倍柱體積，具體可以這樣計算，根據柱內徑和柱長算出色譜柱內體積。短柱一般時間就是30分鍾、長柱一般沖洗60分鍾就可以了。舉例：內經為4.6mm、長250mm，其柱內體積=3.14*4.6*4.6/4*250=4.153毫升，流速是1.0毫升每分鍾，折中取15被柱內體積，則沖洗時間就出來了。
3.色譜柱沖洗
沖洗色譜柱最好在分析結束後，用流動相沖洗到基線平穩，然後用10%左右的有機溶劑沖洗色譜柱，主要是沖洗干凈流動相中的緩沖鹽。然後用100有機溶劑沖洗。最好是梯度變化沖洗。分析物可能為一些能溶解在水中，有些需要用純溶劑才能完全去除。如果分析時間緊迫一定要把鹽分沖洗干凈，一般情況不要用純水沖洗色譜柱，特別是反向柱的填料的鍵合集團容易折斷，對色譜柱造成損傷。色譜柱被使用在某種程度上就是開始被污染了，所以色譜柱的壽命和我們使用的情況有很大的關系。雖然被污染但是對我們分析目標物沒有造成影響我們也就是認為還能用。
4.色譜柱維護沖洗
常見故障篩板阻塞，解決辦法是：a、過濾流動相；b、過濾樣品；c、運用在線過濾或保護柱。
柱頭塌陷解決方法是：：a、避免使用PH>8的流動相（針對大部分硅膠的柱子）；b、使用保護柱 ；c、使用預柱（飽和色譜柱）。
前面談到的不管用什麼溶劑一定要加入一定比例的用機溶劑，主要是考慮到一些疏水基團在有機溶劑裡面容易伸展利於沖洗其包藏的雜質等。當我們的色譜柱在壓力和柱效下降時，我可以拆開泵近端柱頭的螺絲取出篩板，清洗篩板以及觀察裡面的填料，如填料污染嚴重，就要進行挖取一部分被污染的填料然後用其他廢棄的柱子相同填料來填補，用新的篩板或清洗好的篩板擰好螺絲。然後沖洗觀察柱壓變化和測試柱效等。

5.特殊沖洗 強保留物質和大分子化合物在色譜柱中累積，對樣品中的化合物產生額外的保留行為，不僅引起峰形變寬、拖尾，使柱效下降，同時也會引起保留時間的變化，累積到一定程度時還會導致柱壓升高。由於強保留物質和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應，需要一定的時間才會體現出來，但對許多樣品特別是復雜樣品而言，很難判斷其是否含有強保留物質，因此要防止強保留物質的累積，需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙腈清洗色譜柱。
清洗方法：
1.未使用緩沖鹽：每天分析完成後，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min。
2. 使用過緩沖鹽：分析完成後，先用上述方法除去緩沖鹽，然後再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱 60min。
3.補救方法：
水——乙腈——氯仿（或異丙醇）——乙腈——水
每一步以 1.0ml/min 流速反向沖洗色譜柱 60min。

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