A. 小實驗用蒸餾水種蒜兩周能長多長
1天蒜瓣浸潤
2天吸水略膨大
3-6天蒜瓣吸水膨大、有根芽小突起
5-7天芽坯頂出蒜瓣、根芽突出
8-10蒜苗頂出芽坯、根須猛長
11-14天蒜苗的兩片葉片微微張開迎接陽光,根須增多,整個蒜苗程茁壯成長態勢
在適合的溫度濕度條件,15天左右就能發芽,長葉。
B. 豆芽造句-用豆芽造句
1、豆子都裂開一個縫了,縫中悄悄伸出一條白色的 豆芽 。外公說這是它的根,我看著這幾個穿著綠衣裳的娃娃,我越看越喜愛。
2、瞧!那一朵粉紅色的菊花昂首挺胸, 豆芽 似的花瓣緊緊簇擁在一起,遠遠望去,既像一個小絨球,又像一個大家族圍坐在一起商議什麼事情。
3、那一朵粉紅色的萬壽菊昂首挺胸, 豆芽 似的花瓣緊緊簇擁在一起,遠遠望去,既像一個小絨球,又像一個大家族圍坐在一起商議什麼事情。
4、咦!我驚奇的發現一顆白白嫩嫩的 豆芽 已經拔地而起,在豆芽的頂端還長有一對均勻對稱的豆芽。於是我就端來一點水順勢倒下去,這時,我發現對稱的葉子已經不再對稱了,它已經開發了。
5、過了幾天,小 豆芽 慢慢地長大,有兩厘米長了。當我沖洗豆芽時,發現一根豆芽已經鑽進了布里。原來,經過奮力向上,它長進了布里,而且完全嵌了進去。豆芽的生命力真強呀。
6、瞧!那一朵粉紅色的菊花昂首挺胸, 豆芽 似的花瓣緊緊簇擁在一起,遠遠望去,既像一個小絨球,又像一個大家族圍坐在一起商議什麼事情。再瞧那兒,一簇簇菊花堆在一起,在聽秋風老師為她們講故事呢!
7、 豆芽 漸漸地長出了長長的莖。有的豆芽彎得像一個魚鉤,有的直得像一根木棍。豆芽已經發好啦,我真是開心啊。
8、 豆芽 長一房高,也是菜貨。民諺
9、芋艿化痰消郁結,蘑菇能抑癌細胞;海帶含碘治水腫, 豆芽 不讓血脂高;蘆根消熱助潤肺,甘蔗解酒除煩惱;飲食保健常做到,祝你天天樂陶陶!
10、情人變成老婆,鑽戒變成頂針,玫瑰變成 豆芽 菜,巧克力變成白麵包,燭光晚餐變成外賣,甜言蜜語變成家長里短,歲月變遷對你愛不變。情人節快樂!
11、情人變成老婆,鑽戒變成頂針,玫瑰變成 豆芽 菜,巧克力變成麵包,燭光晚餐變成外賣,甜言蜜語變成家長里短,歲月變遷,愛老婆不可變。情人節快樂。
12、以Q的姿態站立, 豆芽 菜形態的腿部造型加上菱形方格的細碎紋樣,更顯明眸皓齒的機靈乖巧。
13、將菜碼、炸醬拌面條而成。將黃瓜、香椿、 豆芽 、青豆、黃豆切好或煮好,做好菜碼備用。
14、把已放涼雞絲和 豆芽 混合後雪凍約兩小時,食用前灑上芝麻即可。
15、「來源是 豆芽 。」德國疫病防控中心負責人萊因哈特?伯格說。
16、炒大 豆芽 不要太猛火,中火炒能夠留住芽菜里的水分。
17、過了兩三天,黃豆寶寶長出了小尾巴,像小蝌蚪一樣。又過幾天,小尾巴越長越長,我看到這些 豆芽 ,高興地跳起來喊道:「豆芽長出來了!豆芽長出來了!」。
18、我今年7歲了,瘦高個兒,眉清目秀,就是臉有點黃,同學們都說我像個「綠 豆芽 」。
19、青草從根的地方起都是發黑的濃綠色,草尖在太陽底下閃著光芒。一棵青草不到十厘米,長得很脆弱,就像菜市場里的 豆芽 菜一樣,一捏就斷。小草長得到處都是,有馬尾草、羽茅草、網紋草……
20、早上醒來,我突然想起今天沒淋水,連忙奔向廚房。我掀開布, 豆芽 已經長有3寸高了。細細的根上頂有2片葉片,並且根已經穿過了紙巾與器皿。它看著我,彷彿沖著我笑呢!
21、盛開的櫻花一般都是五個瓣,中間有長長的花蕊,花蕊一般都有九到十根,象漂亮的黃 豆芽 。未開的櫻花小寶寶,就象一個個快要爆炸的氣球,看起來可愛極了。
22、今天,我來到它們旁邊,發現它長的胖乎乎的,高高的,都變成了一個 豆芽 了,兩旁的豆子都掉了,只剩下豆葉和根了。
23、我想,天才大半是天生的;獨有這培養天才的泥土,似乎大家都可以做。做土的功效,比要求天才還近切;否則,縱有成百成千的天才,也因為沒有泥土,不能發達,就像一碟子綠 豆芽 。
24、立春到,護肝養陽飲食提醒你:多吃蘿卜少吃辣,蔥姜胡椒做調味;韭菜春餅效果好, 豆芽 滋潤也不錯;酸味食物來收斂,以防肝氣的疏泄。願你健康!
25、立冬到,吃餃子,暖暖呼呼一整年!滋補吃肉餡:如牛肉、雞肉、羊肉、蝦等,溫熱益補,禦寒效果好。怕冷吃菜餡:如大白菜、蘿卜、韭菜、油菜、 豆芽 等,補充維生素,促進消化不上火。願你冬日溫暖又健康。
26、靈魂是種子,它可以在知識之水的澆淋下長成參天大樹,也可以在知識之水的浸泡下發成一顆綠 豆芽 。
27、春眠不覺曉~~親們都開始犯「春困」了嗎?七招教你趕走「春困」:1、保護肝膽最重要;2、進行「身體大掃除」(吃飯七分飽等);3、多吃 豆芽 ;4、做伸展運動;5、補B族維生素;6、到戶外和大地「共振」;7、更加重視給身體排毒。
28、早晨喝一杯三鹿氰胺牛奶、兩個染色饅頭、加一根瘦肉精火腿腸、切一個蘇丹紅鹹蛋;中午買避孕葯喂的魚、毒 豆芽 、膨大西瓜,回到豆腐渣房中,開一瓶甲醇勾兌酒、吃一串加了瀉立停的麻辣燙,飯後抽一支高紅煙、看本盜版小說,再用裝了盜版軟體的電腦上網;晚上鑽進了黑心棉被窩,一天就這樣過去了。逐沒
29、看看所有這些餓的要死的男模吧,他們沒有工作,只因為人們愛這個小 豆芽 菜愛到想把他含在嘴裡。
30、德國衛生局關閉了下薩克森的一農場,因為懷疑該農場的蔬菜 豆芽 是最近爆發的大腸埃希菌的源頭。
31、萬物萌生正新春,調養五臟養身心。五行對照春屬木,此時養肝最對路。韭菜 豆芽 和紅棗,菠菜枸杞益肝好,適度小鍛煉健康保。一年養生在於春,願您養成長壽星。
32、水煮魚中的配菜單一,除了魚肉,蔬菜常只有 豆芽 一種。
33、秋天必吃七種菜:蓮藕增強免疫力,菠菜預防口角炎,補脾健胃胡蘿卜,消除疲勞食 豆芽 ,芹菜促消增食慾,益心強腎小白菜,萵筍平喘潤燥多。願你健康!
34、1,冬瓜:皮膚白凈。2,胡蘿卜:能潤澤肌膚。3,蘆筍:能抗衰老和防治各種與脂肪過度氧化有關的疾病。4,甘薯:減少皮下脂肪,有助於護膚美容。5,蘑菇:能防老抗衰。6, 豆芽 :防止黑斑。7,黃瓜:養顏聖品。8,絲瓜:能潤滑皮膚,防止皮膚產生皺紋。
35、歐芹汁;甘藍汁,菠菜汁,小麥草汁,布魯塞爾 豆芽 汁,蘆筍汁,椰菜汁,花椰菜汁,甜菜汁,胡蘿卜汁,捲心菜汁,蒜汁。
36、驚蟄來到肝氣旺,養生切忌動「肝」戈,心胸開闊暢情致,戒怒制郁消肝火,飲食清淡補蛋白,鴨血 豆芽 多吃點,充足睡眠莫勞累,規律運動促循環。溫馨關懷已送到,快樂安康都圍繞!
37、綠 豆芽 :含磷、鐵、大量水分,可防止脂肪在皮下形成.
38、14種春季可能引起死亡的常見食物,食用時可得小心喲!變質發黃的銀耳,變色的紫菜,無根的 豆芽 ,腐爛的生薑,長斑的紅薯,腐爛的白菜,發霉的茶葉,未腌透的鹹菜,發芽的綠土豆,變質的棕色芯甘蔗,新鮮蠶豆,新鮮黃花菜,青西紅柿。
39、單身是香菜,戀愛是芹菜,分手是白菜,結婚是生菜,離婚是酸菜,再婚是剩菜,沒有情人是 豆芽 菜,情人多了是花菜……你是什麼菜?
40、綠 豆芽 所含的熱量很低,但富含纖維,更是暑天餐桌上的常見菜。
41、15-25歲:多吃白菜、 豆芽 、瘦肉、豆類食品等,使皮膚紅潤有彈性;25-30歲:多吃富含維C維B的食物,如胡蘿卜等;30歲-40歲:多吃瓜果,多補充膠原蛋白;40-50歲:多吃補氣養血、延緩皮膚衰老的食品,如玉米、紅薯、檸檬等。
42、情人變成老婆,鑽戒變成頂針,玫瑰變成 豆芽 菜,巧克力變成麵包,燭光晚餐變成外賣,甜言蜜語變成家長里短,歲月變遷,愛老婆不可變。預祝情人節快樂!
43、有點辣,但仍然相當美味, 豆芽 水煮魚味道好極了.
44、湯中的主原料為綠 豆芽 、生薑、番茄和椰子汁。
45、單身是香菜,戀愛是芹菜;分手是白菜,結婚是生菜;離婚是酸菜,再婚是剩菜;沒情人是 豆芽 菜,情人多了是花菜。喜歡什麼菜自己選,可千萬不要去偷菜!
46、採用建立的方法測定了黃豆、 豆芽 、蠶豆、腐竹、豆腐、豆漿、豆奶粉、奶粉等樣品中大豆異黃酮含量,測定結果令人滿意。
47、立春養生三要點,時刻裝在心裏面,乍暖還寒要春捂,黨參枸杞湯里煲,粥類飲食養脾胃,山葯大棗都是寶,戒怒護肝心情爽,芹菜 豆芽 多補給。溫馨關懷送給你,快樂安康都聚齊!
48、 豆芽 棚滑坡系太白岩崩滑體部分復活的產物。
49、立春養生,健康咬春,白菜青椒,陽氣生發,春餅餡料,雞蛋 豆芽 ,粳米煮粥,幫助消化,蘿卜絲餅,強健脾胃,蝦仁韭菜,補腎首選,烏發明目,常食豬肝,關懷送上,安康相伴!
50、這是因為 豆芽 中含有大量的抗酸性物質,可起到很好的防老化功能。
51、第一招:排毒喝花茶,給腸胃減負。第二招:晨練拉拉筋。進行戶外鍛煉,踏青旅遊。第三招:春吃酸甜口。多吃酸甜口味的水果,有助平衡體質。第四招:多吃芽類蔬菜。比如, 豆芽 、豆苗、春筍、蒜苗等。第五招:保持燦爛心情。
52、蔬菜湯香菇泡軟切半、黃 豆芽 去尾、葫蘿卜切丁備用,起油鍋將所有材料加入拌炒,再放入2碗水及素食高湯煮沸即可起鍋。
53、有機麥苗,有機膠洋槐,改性纖維素,二氧化硅,葵花子油,納 豆芽 孢桿菌中提取。
54、春分宜養生,吃對最重要,多吃時令菜, 豆芽 和蒜苗,滋養肝肺果,櫻桃草莓杏,周末兩頓飯,腸胃減負擔,菊花茶常飲,去火功效顯,關懷已送到,願你身體棒!
55、文摘:無土、無營養、無光照情況下,在燒杯內用蒸餾水培育 豆芽 .
56、1、白蘿卜:抑制黑色素,防止脂褐質沉積。2、豌豆:潤澤皮膚。3、蘑菇:防老抗衰。4、絲瓜:防止皺紋。5、 豆芽 :防止雀斑、黑斑。6、黃瓜:清潔美白肌膚,消除曬傷和雀斑,緩解皮膚過敏。
57、我試了試泡菜這道名菜是用 豆芽 、海藻和蕪箐甘藍等所做成。
58、普通炒飯配料: 豆芽 、叉燒、蟹肉、香腸.
59、春季容易肝火旺,三種蔬菜巧降火;肝氣疏通 豆芽 菜,肉片一起煲湯佳;養陽最佳是韭菜,豬血同煮營養妙;菠菜排毒利腸胃,榨汁涼拌兩相宜。願快樂安康!
60、將 豆芽 菜及五香豆腐乾放入沸水中略為川燙,瀝乾.
61、你什麼時候見到 豆芽 菜能吃成胖大海?樂小米
62、這道由西貢流傳而來的牛肉湯中有進口薄牛肉片、牛肉球和 豆芽 。配有泰式寬河粉。
63、微微,萌芽要光合作用,不見光的是 豆芽 。顧漫
64、西班牙的黃瓜、西紅柿、德國的 豆芽 和埃及的葫蘆巴種子都曾被認為是最初的感染源,但最後均未得到確認。
65、①保護肝膽:少吃油炸食品,常吃堅果;②進行身體大掃除:禁煙,少食用糖和咖啡;③多吃 豆芽 :有助補充維生素、礦物質、氨基酸等營養物質;④做伸展運動:年輕人最好做瑜伽,老人可以練氣功;⑤補充B族維生素:鎮定神經系統;⑥多進行戶外運動:放鬆精神,減輕壓力。
66、春季養生有門道,分享給你請記牢;多吃時令春之芽,香椿 豆芽 和蒜苗;菠菜解毒防春燥,沸水燙軟撈出炒;溫補脾胃有糯米,做成糕點味美妙。願快樂安康!
67、無土、無營養、無光照情況下,在燒杯內用蒸餾水培育 豆芽 .
68、涼皮吃時放入麵筋、 豆芽 、黃瓜絲等,然後潑上辣子油、醬油、醋、蒜汁等各種調料,拌勻即可食用。
69、另外一種叫做banhxeo,類似法式薄餅,用米粉和椰奶麵糊製成的面餅,裹上豬肉餡,蝦仁和 豆芽 ,下面鋪上一些新鮮的生菜,薄荷葉和羅勒,配以辣椒蘸醬。
70、春分時節來「吃春」。養脾佳品大紅棗,補中益氣有蜂蜜,時令食物春之芽( 豆芽 、蒜苗等),嘗鮮無不道春筍,菠菜解毒防春燥,蔥蒜殺菌助春陽。
71、第一招:排毒喝花茶,給腸胃減負;第二招:進行戶外鍛煉,踏青旅遊;第三招:多吃酸甜口味的水果,有助平衡體質;第四招:多吃 豆芽 、豆苗等芽類蔬菜,營養豐富,易於消化;第五招:多和朋友聯系,保持燦爛心情。妙招祝我的朋友永健康!
72、穀雨養生道,貼心分享你,芽菜補陽氣, 豆芽 常吃妙,辛辣耗陰津,再饞節制好,呵護腎氣先,黑米黑豆棗,菊花枸杞茶,清腦明目方。關懷送上,願你安康!
73、將面盛入盤中,放上瀝乾的 豆芽 菜、紫圓白菜絲、胡蘿卜絲,最後淋上醬汁,拌勻即可。
74、把豆子長時間浸水後,就會長出 豆芽 菜.
75、三伏養生吃三寶,解熱防暑體力好。味美黃鱔是首寶,補中益氣有奇效;消暑蓮藕是二寶,補養脾胃防三高;綠 豆芽 菜是三寶,清熱解毒清涼繞。
76、如果你對這些水果吃厭煩了,辣的胡椒,柿子椒和 豆芽 也含有大量的維生素C。
77、盡管三部委日前發布聯合公告劃定禁用紅線明確「無根水」的監管,但這份禁用令未就「無根 豆芽 」監管的根本問題提出解決方案。
78、上海年夜飯菜餚很富特色,除魚肉雞鴨外,還添上炒塌棵菜和糖醋銀絲牙兩樣菜底,另外必備如意菜,就是我們所說的黃 豆芽 和發芽豆,含有「開發」的意思。
79、 豆芽 菜中的植物性硫配醣體,可以防止煙霧和空氣中的其他污染物引發肺癌,一周四杯到八杯紅葡萄酒,則可以大大降低前列腺癌的幾率。
80、樣, 豆芽 菜的身材,永遠好像擦不幹凈的鼻涕湯,說話細聲細氣的一股「娘娘腔」。
81、我聽人家說,這個超級小 豆芽 身長九尺,面如冠玉,氣度不凡,就連面對聖戰無敵的猛烈攻擊時都面不改色呢。
82、醬干丁、腐皮拌 豆芽 、肉末五香豆、百葉雪菜、什錦泡菜、苦瓜筍絲,皆取清淡與原味。
83、「不要,夾走!」我就夾回來,結果不小心把她的一根 豆芽 也夾過來了。
84、最有特色的是「剝龍皮」,即烙上薄薄的烙餅,中間抹上甜面醬,卷以蔥絲、肉絲、 豆芽 、粉絲、韭芽混合炒制的菜餚。
85、至於吃芝麻醬面的菜碼兒,黃瓜絲屬於最基本的,還應該有水蘿卜絲和切成末兒的青蒜,或是胡蘿卜絲和開水焯過的 豆芽 兒菜。
86、「胖墩」往往是被家長「塞」出來的,「 豆芽 兒」的挑食習慣是父母慣出來的。
87、做土的功效,比要求天才還切近;否則,縱有成千成百的天才,也因為沒有泥土,不能發達,像一碟子綠 豆芽 。
88、當天下午,樊曉霖將一百多斤 豆芽 逐一送出,並謹守諾言,分文未取。
89、舉個例子,有一頓是荷葉包蒸肉、清炒蝦仁、素拌 豆芽 、紅燜雞塊,湯是鳳足冬菇。
90、為縮短 豆芽 生長周期,讓賣相更好,竟大量使用「無根水」等有毒葯劑生產銷售毒豆芽4萬余斤。
91、該實驗室負責人向記者證實,浸泡 豆芽 的水裡含有次氯酸鈉(即漂白液,晶體俗稱漂白粉)等成分。
92、劉哥見一群吃貨連盆底幾根香菜、幾枚 豆芽 都不放過,哪還忍心和我們爭搶,只推說下午去市裡辦事時已吃了一大碗當地赫赫有名的胖嫂麻辣燙解饞。
93、菜市場上很多 豆芽 因為「賣相好」受到一些消費者青睞,豈不知光鮮亮麗的外表之下,卻「厚味臘毒」。
94、自製綠 豆芽 ,這是一個等待生命抽長的過程,體驗自己動手的樂趣。
95、正月初六後,寧波各家開始做「新年羹飯」,七碗、八碗,或者十二碗,其中必有魚肉、 豆芽 、豆腐、年糕等。
96、「素什錦要買足十樣素菜用來涼拌,蓮藕代表年年都有, 豆芽 長得像如意,韭菜就是長長久久……」走在前面的幺爸一邊帶路一邊念叨著給記者「上課」。
97、執法人員在兩作坊內發現不銹鋼斗狀容器、電動篩洗機、鍋爐等 豆芽 加工設施,並對處不同生長周期的黃豆芽、綠豆芽進行抽樣。
98、楊炳輝記得,父親把黃豆在木桶里泡發,不出幾天嫩 豆芽 就能出街,白天挑出去賣,賣不完的帶回家吃,靠這門手藝就養活了一家人。
99、 豆芽 性偏寒涼,吃多了易寒涼敗胃,因此,證屬脾虛、寒濕的患者不能多吃。
100、半杯毛豆只有95卡路里,但卻含有超過八克的蛋白質,黃 豆芽 就是一個很好的零食選擇。
101、海帶絲、黃 豆芽 、蘑菇、姜蔥、鹽油、少量醋。
102、海龜、海豹、海狗、紅珊瑚都是海洋中的珍稀物種,另外像文昌魚、矛尾魚、海 豆芽 等也都是遺存下來的古老物種。
103、綠 豆芽 性偏寒涼,吃多了容易寒涼敗胃,因此,證屬脾虛、寒濕的患者,如患有慢性腸炎、慢性胃炎、泄瀉等病的人不能多吃。
104、(記者馬駿)在個別家長和學校當中,體育課很容易被當作「 豆芽 兒課」遭到忽視。
105、繳獲無根水700餘瓶濟南端掉毒 豆芽 黑窩點。
106、舉報線索中,問題肉、桶裝水、毒 豆芽 和地溝油問題較為集中。
107、比較好的 豆芽 機品牌有小熊、現代、歐旺、康麗等,價位從100元到500元不等。
108、如果莖和根呈茶色且較萎軟,說明發芽的豆質不新鮮,不要購買這種 豆芽 。
109、前者是在泡豆時使用,它會使 豆芽 不會長毛根,因為無根會比較漂亮,比較好吃,後者可以抑制豆芽長虛根和控制豆芽葉子的成長速度。
110、在班上,身材瘦弱的阿文是典型的「 豆芽 菜」,性格內向,說話輕聲輕氣,學習成績倒是不錯。
111、2005年,「 豆芽 拌豆芽」在某游戲論壇中結識了王剛,其時王剛是一個游戲板塊的管理員,也是網路游戲「三國戰記」的高手。
112、西紅柿滾湯是家常最常見的湯水之一,配些 豆芽 、香芹菜就是色、香、味俱全的素湯。
113、孫某所說的「無根水」,其全稱是「無根綠 豆芽 激素」。
114、鄧小玲說,市民去買 豆芽 時,應盡量去大型超市裡買,如果在其他地方買則要注意:一聞,二看,三掐。
115、一般,家裡都會預備一些炸醬,萬一哪天來不及炒菜做飯,或者懶了,下鍋面條兒,焯些白菜葉、 豆芽 、青豆黃豆當菜碼兒,拌上一大碗熱面條「呼嚕呼嚕」。
116、冬瓜、綠 豆芽 、小白菜、苦瓜等能清熱;薏苡仁、芡實、赤小豆等能利水滲濕。
117、吃的時候,我好心夾了一片冬瓜給她,她說不要,夾走!我就夾回來,結果不小心筷子帶到她的一根 豆芽 ,也一起夾過來了。
118、除了大家熟悉的芹菜、韭菜外,綠 豆芽 、魔芋、烏塌菜這。
119、據劉某稱,「問題 豆芽 」主要通過何莊子批發市場銷往本市各個區縣,每天的銷量在40-60桶,約為2000斤,每斤售價為8毛左右。
120、 豆芽 誇誇其談的一講就是半個時辰,內容十分精彩。
C. 大蒜脫毒繁殖的主要技術包括哪些
(1)脫毒蒜種微繁的環境要求
在離體培養條件下,大蒜任何組織培養成脫毒試管苗、試管鱗莖,都需要適宜的基質、營養、溫度、濕度、光照等條件;同時,需要外源補給適宜、適度的激素,以誘導和促進愈傷、生根、發芽、生長發育、成苗和鱗莖膨大等。具體要求如下:
①營養要求:
無機營養:氮、磷、鉀、硫、鈣、鎂等大量元素和鐵、錳、銅、鋅、硼、鈷、鉬等微量元素是大蒜生長發良必需的營養元素。在培養基中的活性成分為離子形式,一種類型的離子可由一種以上的鹽提供。
有機營養:包括氮源和碳源。為了能使組織生長良好,在培養基中常需補加一種或數種維生素和氨基酸,其中,維生素B1是必不可少的,維生素B3、維生素B6和肌醇都能改善大蒜培養組織的生長狀況。
②基質:脫毒蒜組培多用瓊脂培養基作為基質,一般使用濃度為0.5%~1.0%。
③激素:除了營養物質外,為了促進組織器官的生長,通常必須由外源補給一種或數種植物生長調節物質,對這些物質的要求因外植體組織、培養階段和增減目的的不同而有很大的變化。
生長素:有組培中,生長素被用於誘導細胞的分裂和根的分化。常用的生長素有:NAA(萘乙酸)、IAA(吲哚乙酸)、IBA(吲哚丁酸)、NOA(萘氧乙酸)、2,4-D(二氯苯氧乙酸)等。其中,NAA和IBA廣泛用於生根,並能與細胞分裂素配合促進莖的增殖。2,4-D是誘導外植體愈傷組織不可缺少的,不同外植體對2,4-D濃度要求不同,莖尖需0.125毫克/升2,4-D的MS培養基,試管苗的莖需0.5毫克/升2,4-D的MS培養基。
細胞分裂素:主要具有促進細胞分裂和從愈傷組織或器官上分化不定芽,有助於使腋芽從頂端優勢的抑制下解放出來,促進莖的增殖作用。常用的細胞分裂素有BAP(苄氨基嘌呤)或6-BA(6-苄基腺嘌呤)、ZT(玉米素)和KT(激動素)等,其中以6-BA最為常用。
赤黴素:具有促進大蒜莖尖發生多芽及穩定微管、拮抗鱗莖形成的作用。赤黴素有20多種,主要由根系供給,去除根系可促進葉鞘細胞的膨大,有利於鱗莖形成。在大蒜鱗莖形成過程中,赤黴素含量先下降,後上升,赤黴素含量降低對鱗莖形成有利。長日照誘導大蒜植株體內赤黴素含量降低是事實,故長日照對鱗莖形成的促進作用是通過影響內源赤黴素水平實現的。
乙烯:乙烯通過改變細胞壁形狀和纖維素微纖絲的排列方向來刺激葉鞘細胞的側向膨大,而不是縱向拉長。另外,乙烯可誘導葉片衰老,通過抑制葉片生長,使葉身和葉鞘長度相對比例發生改變,從而有利於鱗莖形成。
④酸鹼度要求:在滅菌前,培養基的酸鹼度一般調至pH5~6。當pH<5時,培養基(瓊脂)不能凝固;pH>6時,培養基將會變硬。但熊正琴(1999)觀察到,大蒜幼芽在pH=6.4時生長最佳,增殖最快。劉高瓊(1995)認為,徐州白蒜和太倉白蒜組培幼芽分化數、發根數和幼芽生長的最佳培養基酸鹼度為pH=7.5(微鹼性)。
⑤溫度和光照要求:
溫度:在大蒜試管苗培育中,溫度一般為15~20℃,較低的溫度及較大的溫差有利於培育壯苗;試管蒜苗必須經過一段低溫(<20℃)春化階段後,進入較高溫度和較長、較強的光照條件後才能誘導試管鱗莖的形成與膨大,大蒜試管鱗莖形成與膨大的適溫是20~25℃。
光照:對光照的要求實質上是對光周期、光強、光質的要求。
光周期:試管苗培育的光周期以12小時為宜。光周期長短對鱗莖形成至關重要,較長的日照條件有利於鱗莖膨大。但鱗莖形成對光周期反應的要求因大蒜品種生態型而異,如低溫反應遲鈍型蒜種,在12小時日照下,一般不形成鱗莖,日照長達16小時雖能形成鱗莖,但發育不良;而低溫反應敏感型蒜種,在12小時日照下鱗莖發育良好。
光強:在一定的光周期下,強光照比弱光照條件下易於形成鱗莖。光照強,合成的碳水化合物就增多,其積累的多少是鱗莖膨大的物質基礎。但對鱗莖形成的誘導,即使弱光照,只要光照時數超過臨界周期,均可開始形成鱗莖。
光質:對大蒜使用白熾燈補光,對試管鱗莖形成與膨大具有明顯的促進作用。植物光敏素的光平衡態Φ值與光質關系很大,通常用R∶FR(紅光:遠紅光)光量子比率來衡量,隨著R∶FR值降低,鱗莖膨大速度加快,光質在鱗莖形成中起著重要的調節作用,且這種調節作用與其內源乙烯生成可能有關。
(2)脫毒大蒜組培培養基的制備
①配製濃縮儲備液:大量元素濃縮20倍、微量元素濃縮200倍,鐵鹽濃縮200倍,除蔗糖之外的有機物質濃縮200倍。在配製這4種儲備液時,應使每種成分分別溶解,然後再把它們彼此混合。
各種激素的儲備液應當分別配製,如果不溶於水,則應先溶解在少量的適當溶劑中,然後再加蒸餾水到最終容積。根據所要求的激素濃度水平,其儲備液的濃度可以為0.001~0.01微摩爾/升。生長素一般溶於95%酒精或0.01微摩爾/升的氫氧化鈉中,後者的溶解效果更好。細胞分裂素一般溶於0.5~1微摩爾/升的鹽酸或稀的氫氧化鈉溶液中。赤黴素易溶於冷水,但GA3溶於水後不穩定,容易分解,最好用95%酒精配成母液。
所有的儲備液應儲存在適宜的塑料瓶或玻璃瓶中,放置冰箱中保存。鐵鹽儲備液必須儲存於棕色玻璃瓶中。在使用這些儲備液之前,輕輕晃動瓶子,如果發現其中有沉澱、懸浮物或微生物污染,則必須立即將其淘汰。在制備儲備液和培養基時,應當使用蒸餾水或去離子水以及高純度的化學試劑。
②制備培養基的步驟
a.稱量規定數量的瓊脂和蔗糖,加水到最終容積的2/3,加熱使之溶解。因蔗糖易溶解,也可以在瓊脂溶解之後加入。
b.分別加入一定量的各種儲備液。如果由於特殊原因需要在高壓滅菌之後再加入維生素和激素,則可在調節這些物質溶液的pH後,使之通過微孔濾器(孔徑為0.22~0.45微米)消毒。
c.加蒸餾水至培養基的最終容積。
d.充分混合後,用0.1微摩爾/升。氫氧化鈉和0.1微摩爾/升鹽酸調節培養基的pH。
e.趁熱將培養基(為均勻的液態)分裝到所選用的培養容器中(約為容器容積的1/3)。
f.用包在紗布中的棉塞或鋁箔、牛皮紙等其他適宜的塞或蓋封嚴瓶口。
g.將其在121℃,1.15×105帕斯卡壓力下滅菌15~20分鍾。
h.使培養基在室溫下冷卻後低溫下保存,所有培養容器都必須做好標記,使得在高壓滅菌和貯藏後也能清楚地識別。
(3)脫毒大蒜微繁的操作技術
①脫毒大蒜組培的技術體系可以是試管苗,也可以為試管鱗莖。從外植體可以直接誘導芽的再生、增殖,保持種性穩定,也可以先誘導形成愈傷組織,再增殖分化。因此,大蒜組織培養可分為四條途徑:一是由外植體誘導再生試管苗;二是由外植體直接誘導形成試管苗;三是誘導愈傷組織再生植株後在試管內形成小鱗莖;四是由直接萌芽形成的試管苗在試管內形成小鱗莖。
由於經愈傷組織途徑容易發生變異,因此,在以保持品種優良特性為原則的脫毒擴繁過程中應慎用。
②脫毒大蒜組織無菌培養的一般步驟:
a.將大蒜瓣(或蒜薹切段)置於玻璃瓶中,在超凈工作台上,先用75%酒精進行表面消毒5分鍾(或40秒),再在含有幾滴活化劑的種類及濃度適當的消毒液(如0.2%升汞液)中消毒20分鍾或12分鍾。在消毒期間需搖動玻璃瓶2~3次。
b.消毒處理後,將消毒液倒出,加入適量的無菌蒸餾水,搖動數次,將水倒掉,如此重復3~4次。
c.將材料取出,置於已經滅菌的培養皿中。
d.在對大蒜材料進行消毒處理的同時,對所要使用的器械進行消毒,方法是把它們浸入95%酒精中,取出後再置酒精燈火焰上灼燒,待冷卻後即可使用。所有器械往往需要在每次使用後消毒1次。
e.使用這些消毒過的器械從已經過表面消毒的材料上切取適當的外植體——莖尖。
f.將培養容器的蓋或塞打開,將外植體接種到培養基上。如果使用的是玻璃容器,把瓶口置酒精燈火焰上烘烤數秒,然後迅速用瓶蓋或瓶塞封嚴。
g.培養基及器皿滅菌採用常規方法即高壓滅菌法操作。
③脫毒大蒜試管微繁的操作技術:
a.從外植體直接誘導芽和根的形成。從外植體直接誘導產生不定芽和根,一般要經過起始培養、不定芽的誘導和生根培養等過程。各種外植體在MS、B5、LS培養基中均可再生為完整植株。
細胞分裂素的存在是芽形成的前提。較高濃度的BA促進芽形成,添加1~2毫克/升BA即可誘導芽的形成。無激素培養基利於生根,培養基中添加NAA促進生根,但添加BA會抑制生根。
外植體來源不同,對激素要求不同。從花薹再生芽只需0.1毫克/升NNA的MS培養基。從蒜瓣分化芽中,低濃度生長素(NAA)與高濃度細胞分裂素(KT)配合分化最好;幼芽的增殖要求生長素濃度高於細胞分裂素,添加0.1毫克/升玉米素(ZT)時促進帶幼葉的莖盤中不定芽的分化而形成叢生芽。加入一定濃度GA3有利於莖尖誘芽。青黴素的存在有利於芽的形成,同時降低污染。
貯藏溫度對產殖珠影響隨外植體而異。蒜瓣5℃低溫貯藏後促進芽和根的形成。而氣生鱗莖60天5~7℃低溫處理後只促進發芽率,並不影響芽數。取材部位不同,萌芽能力差異很大。只有帶節處的花莖培養才能誘導萌芽,花莖其他切段無效。
b.試管苗的馴化、田間生長。試管苗一般需先用蛭石、岩棉、珍珠岩等做基質,營養液澆灌,進行馴化栽培。在移栽時接種Glomus mosseae可促進試管苗生根,提高成活率。具根小鱗莖的試管苗移栽成活率達92%,明顯高於有根但無小鱗莖的試管苗(53%)。
④脫毒試管鱗莖微繁的操作技術:試管鱗莖的培育一般要經起始培養、芽的增殖、試管鱗莖形成3個階段。在外植體啟動,愈傷組織誘導,試管苗生根等大蒜離體培養中均有關於大蒜試管鱗莖形成的實例。用莖尖、莖盤、帶幼葉的莖盤、雙鱗片、花薹等外植體,在MS、或B5、或LS培養基上均能形成試管鱗莖。
低濃度激素(BA、NAA)促進鱗莖形成,甚至以無激素培養基為優。以莖尖為外植體時,低濃度的激素促進鱗莖的形成;莖盤為外植體時,2毫克/升BA促進鱗莖的形成,高濃度BA促進芽形成。NAA有利於小鱗莖根的形成,培養基中1.0毫克/升NAA使80%小鱗莖生根。鱗莖在2毫克/升NAA+BA0.05毫克/升的MS培養基上有利形成,無激素上膨大。
較高濃度(90~120克/升)的蔗糖有利於鱗莖形成。在培養基中添加(5克/升)活性炭能促進鱗莖的形成。長光照、遠紅光促進鱗莖形成與膨大。
不同生態型品種在同一離體條件下形成鱗莖的數量、質量有差異。離體條件下,試管鱗莖的形成對光周期的要求在春、秋品種間差異顯著,3~4℃低溫預處理促進鱗莖形成,春蒜品種必需經過低溫預處理才能形成鱗莖。
環境條件對鱗莖形成的誘導作用不能用改變培養基成分來替代。試管鱗莖不需馴化,直接移栽。試管鱗莖大小與田間發芽率、株高、產量呈正相關。試管鱗莖大小及種植密度影響鱗莖的產量及質量。形成的試管鱗莖(晚熟種)經35~20~5℃後可打破休眠。
熊正琴等(1999)用生長整齊一致的徐州白蒜脫毒試管苗為外植體,經起始培養基、繼代增殖培養基、鱗莖誘導培養基的連續培養後,可使鱗莖誘導率達90%,鱗莖鮮重達300毫克以上,鱗莖直徑達15毫米。
⑤提高微繁系數:
a.選擇適宜的外植體。芽是脫毒蒜速繁的基礎,誘導外植體直接產生脫毒多芽,可大大提高快繁基數。
大蒜品種間莖尖發生芽數差異明顯。休眠鱗莖莖尖發芽數顯著少於已經打破休眠的鱗莖。通過低溫處理種蒜可明顯增加莖尖發芽數,剝離莖尖大小也影響所發生的芽數,帶2~3個葉原基的大莖尖比帶1個葉原基的小莖尖發生的芽數多,但大莖尖所得苗的脫毒率低於小莖尖。將鱗莖置於37℃熱處理20~30天,大莖尖苗脫毒率與小莖尖相似。因此,先將鱗莖熱處理,再剝離大莖尖培養,即可獲得脫毒率高的多芽。
蒜薹可以產生多氣生鱗莖,表明具有很強的腋芽萌發潛力;同時作為生殖器官和分生組織,生殖莖尖具有更多的腋芽原基和更強的脫毒潛力。大蒜不同品種間生殖莖尖發生芽數差異明顯,芽多者往往生長較弱,必須切割分離多芽進行壯苗培養。
b.提高代增殖系數。適時切割起始培養基中形成的多芽進行繼代增殖,是提高代增殖系數關鍵環節。培養基中的激素種類、濃度及比例以及愈傷組織的誘導、分化及鱗莖形成等都會影響代增殖系數。
愈傷組織的誘導:培養基MS、B5、改良B5(BDS)、LS、N6中均可誘導愈傷組織產生。外植體不同,對激素要求有差異。莖尖和葉片在含1~2毫克/升IAA或0.05~1.0毫克/升2,4-D的培養基上具有很好的出愈率。2,4-D和KT對誘導花梗形成愈傷組織是必要的。添加2,4-D後,花薹就會形成愈傷組織。花葯培養在2毫克/升NAA的B5培養基中,誘導愈傷組織效果好。分生狀根瘤(MRTs)的形成需較低濃度(0.5毫克/升)NAA及無KT,根瘤的形成與正常生根能力呈負相關。蒜瓣低溫貯藏促進愈傷組織形成,但無2,4-D時,蒜瓣低溫預處理並不促進愈傷組織的形成。花葯5℃低溫預處理1~2天有利於愈傷組織的誘導。
愈傷組織的增殖:愈傷組織的生長一般不要求光照,溫度以25℃較宜。定軌搖床培養時,70轉/分種時利於愈傷組織生長,150轉/分鍾時促進球狀體的形成,繼而可再生成苗。莖尖愈傷組織在含較高濃度BA、NAAR的MS培養基中增殖生長最快。2毫克/升IAA促進愈傷組織的生長,而IBA、BA無此作用。
愈傷組織的分化:愈傷組織的分化通常要求光照。不同來源的愈傷組織分化能力不同。從葉原基來的愈傷組織比從莖尖誘導的更易分化;從花葯來的外植體最有利於芽的形成、增殖和生根,不正常的根容易分化不定芽,在0.5毫克/升IAA+5毫克/升BA中最佳。分生狀根瘤(MRTs)可作為一種好的外植體,因其形成的愈傷組織具有很好的器官形成能力。小根和花梗上部比大根、花梗基部來的愈傷組織易於芽和根的再生。
芽、根的分化條件有異:高濃度NH4+利於芽分化。BA對幼苗的分化是不可缺少的。無2,4-D時利於再生。王洪隆報道,高濃度細胞分裂素和低濃度的生長素利於芽的分化,在無激素的MS培養基中可生根。低濃度的BA、NAA利於植株再生。
不同來源愈傷組織的分化對激素要求有異。從花薹來的愈傷組織在2,4-D存在時即可分化芽和根。試管苗根尖形成的根瘤分生組織可在0.5毫克/升NAA或0.5~1.0毫克/升NAA+1.0毫克/升KT的MS培養基中再生為完整植株。愈傷組織的分化隨培養基的不同,對激素要求也不同。不定芽的發生在B5培養基中需要高濃度的KT(2~4毫克/升),在LS培養基中需要低濃度的BA(0.25毫克/升)。花葯愈傷組織在B5培養基上分化效果比在LS培養基上好。花梗愈傷組織經低溫處理對芽分化是必要的。從愈傷組織分化出來的當代植株,由於根主要是從愈傷組織塊上長出來,而不是從幼苗基部長出,最終造成根、芽脫離,移栽成活率只有10%~20%,有效的解決方法是從幼苗直接誘導出鱗莖。
愈傷組織的變異:愈傷組織形成過程中的染色體變異可能與生長調節劑種類、濃度有關。Dolezel等用BDS培養基研究表明,5~50微摩爾/升NAA增加有絲分裂異常的細胞數目,但當總的激素濃度達500微摩爾/升時顯著抑制有絲分裂活性,使有絲分裂異常,所以較低濃度的激素可使細胞有絲分裂正常化。
隨繼代時間延長,變異加重。愈傷組織繼代4個月後,二倍體從開始的52%下降至16%,且再生頻率降低。繼代時間一年後,芽的分化率從60%降至10%。1~3戈瑞輻照葉片後可促進愈傷組織生長,且不影響苗的再生,可用於突變體篩選。
綜上所述,使試管苗健壯生長、提高試管鱗莖誘導率並促進其膨大的所有因素,都將影響脫毒大蒜微繁系數的提高。
⑥注意事項:
a.病毒檢測。盡管在切取莖尖時十分小心,並且對其進行了各種有利於消除病毒的處理,也只有一部分培養物能夠產生無病毒植株。因此,對於每一個由莖尖產生的植株,在用做母株以生產無病毒原種之前,必須針對特定的病毒進行檢驗。培養植物中,很多病毒具有一個延遲的復甦期。因此在頭18個月內必須對植株進行若干次檢驗。只有那些的確已經脫除了某種病毒,才可以在生產上推廣使用。由於經病毒檢驗的植株仍有可能重新感染,因而在繁殖過程和各個階段還需進行重復檢驗。必須在能杜絕任何侵染可能性的條件下繁殖這些確已脫毒的植株。
b.優選株系。將培養後代按生長勢分類,每次選用生長一致的植株進行繼代培養,個體間就會生長充分,不受抑制。
c.適時誘導鱗莖形成。試管鱗莖的培育一般要經起始培養、芽的增殖、試管鱗莖形成3個階段。但芽的增殖階段不能無限地進行下去,必須適時誘導鱗莖形成。試管鱗莖形成需要一定的幼苗生長為前提,同時應盡可能在溫度較高的夏秋季節誘導鱗莖形成,以降低生產成本,並能與大田生長季節相銜接。
d.適時更新換代,防止玻璃化。當一種無菌培養方法建立後,很容易連續繁殖下去,而不與原親本植株進行比較,就可能使培養早期發生的變異積累起來。同時,根據研究經驗,若不斷重復進行離體繁殖,部分培養物的葉片常常變成漬水狀,幾乎是半透明的,此類試管苗的生長和繁殖速度將會下降,最後甚至死亡,這就是玻璃化現象,很難徹底消除。因此,應當注意適時更新換代,防止玻璃化。