1. 稀釋50*TAE溶液到1*TAE是用蒸餾水還是一般的水
做膠的TAE當然用雙蒸水
如果是槽中使用的電泳緩沖液,單蒸水也可以
2. 為什麼不可以用蒸餾水配置瓊脂糖凝膠
因為配置的瓊脂膠主要要求是達到無菌。因此普通的蒸餾水就不合適了。要採用無菌水來進行配置。這樣可以防止配置好的瓊脂中不會產生雜菌。
3. 在進行瓊脂糖凝膠電泳前,用什麽溶液來溶解瓊脂糖 A蒸餾水 B自來水 C緩沖液 D甘糖溶液
C
4. 瓊脂糖凝膠是用什麼液體配置的
主要的原因是保持瓊脂凝膠和周圍的緩沖體系保持相同的pH值,當然這種pH值是前人優化過的,最有利於核酸分離和穩定的pH條件;如果凝膠和緩沖體系的pH存在較大的差異,勢必會影響核酸的分離效果。
5. 在進行瓊脂糖凝膠電泳前,用什麽溶液來溶解瓊脂糖 A蒸餾水 B自來水 C緩沖液 D甘糖溶液
A.蒸餾水
最好是超純水
6. 瓊脂糖凝膠的配製
倒平板一定要緩慢,當然是相對緩慢不能等它凝固了,這樣可以避免倒板中出現氣泡
另一個,你配凝膠溶液的時候攪拌一定要輕柔緩慢,不然你想不出氣泡都難
7. 1.0%瓊脂糖凝膠如何制備
秤一克瓊脂糖,加100毫升蒸餾水。
但是,一般跑電泳的時候,需要加TAE緩沖液,50×TAE加2毫升,再加98毫升蒸餾水。
配瓊脂糖,差一兩毫升沒什麼影響的,我們實驗室用的是百分之二的。
8. 配置瓊脂糖膠時,可以用蒸餾水和高濃度的TAE液嗎
1.用蒸餾水將制膠工具洗干凈 准備好制膠平板 用瓊脂將模具邊緣封閉 架好梳回子
2.根據要分離的答樣品(DNA)大小配製合適濃度的瓊脂凝膠 准確的稱取一定量的瓊脂糖乾粉 加入到合適體積的錐形瓶中 加入一定量的電泳緩沖液(30ml左右TAE) 放入到微波爐內加熱融化 冷卻片刻(不燙手即可)
3.融化後的瓊脂溶液搖晃混勻 倒入電泳槽中 等其凝固
4.室溫下凝固30-40min左右 小心的拔出梳子 取出凝固好的凝膠放入電泳槽內 准備上樣
5.在電泳槽中倒入電泳緩沖液(TAE)沒過膠面1mm左右 去除膠孔內的氣泡
6.上樣 5ulDNA樣品加入1ul上樣緩沖液(loading buffer)和1ul的染料 用搶混勻後加入到凝膠孔內
.上樣結束 接通電源 紅色正極 黑色負極 DNA樣品有負極往正極運動 加樣孔側為負 40-50v電壓 電壓30敏左右即可(< 40min)
8.電壓結束 關閉電源 凝膠成像儀上觀察電壓位置並比對marker判斷大小
9. 瓊脂糖凝膠怎麼配製
把瓊脂糖,即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂,溶於熱水,倒入玻璃杯中,冷卻製成的凝膠。融化後在37°C下可維持液態數小時,30°C時凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。
製成的小顆粒用於凝膠過濾,適於用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級分離細胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點,有時用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內沉降反應的支持物。
(9)可以用蒸餾水配置瓊脂糖凝膠嗎擴展閱讀:
瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經化學修飾後熔點降低的低熔點瓊脂糖,瓊脂糖的熔點在62〜65°C之間,多用於對染色體DNA在凝膠內進行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠由於孔徑大常用於大分子蛋白質、DNA的分離。
瓊脂由瓊脂糖和瓊脂果膠兩部分組成:
作為膠凝劑的瓊脂糖是不含硫酸酯的非離子型多糖,是形成凝膠的組分,其大分子鏈鏈節著1,3苷鍵交替相連的β-D-半乳糖殘基和3,6-內醚-L-半乳糖殘基 。而瓊脂果膠是非凝膠部分,是帶有硫酸酯、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的復雜多糖,也是商業提取中力圖去掉的部分。
商品瓊脂一般帶有2%~7%的硫酸酯,0%~3%的丙酮酸醛及1%~3%的甲乙基。在工業上的瓊脂 色澤由白到微黃,具有膠質感,無氣味或有輕微的特徵性氣味,瓊脂不溶於冷水,易溶於沸水。
瓊脂系選用優質天然石花菜、江蘺菜、紫菜等海藻為原料,採用科學方法精煉提純的天然高分子多糖物質。
瓊脂為親水性膠體,分有條狀和粉末狀,不溶於冷水,易溶於熱水。瓊脂在工業上具有獨特的重要性,瓊脂的濃度即使低至1%仍能形成相當穩定的凝膠,是食品工業、化學工業、醫學科研所必需之原料。
10. 剃度稀釋都用蒸餾水還是用溶解溶劑
做膠的TAE當然用雙蒸水
如果是槽中使用的電泳緩沖液,單蒸水也可以