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測蛋白蒸餾

發布時間:2020-12-15 19:15:30

Ⅰ 凱氏定氮法測定蛋白質,蒸餾液加入過量的氫氧化鈉後呈色

綠色
因為所用混合指示劑在鹼性溶液中呈綠色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈紅色。如果沒有溴甲酚綠,可單獨使用0.1%甲基紅乙醇溶液。

Ⅱ 蛋白質測定時,樣品經消化蒸餾之前為什麼要加入氫氧化鈉加入量對測定結果有何影響

1加入氫氧化鈉是因為氫氧化鈉和硫酸銨在加熱條件下生成氨氣溢出。
2加入量需要過量回,估計樣品氮含量,計答算所需量,加入量最少超過所需量,還要中和消解過程中未分解的硫酸一般是1.5倍+消解時加入的硫酸量
3溶液顏色變化,如果本來是澄清溶液,此後會變黑、褐灰等顏色
4顏色變化是銅離子的存在的原因,變黑是銅離子和氫氧根離子變成氫氧化銅。不穩定生成氧化銅(黑色)所致
5如果沒有變化,是加人氫氧化鈉量不夠所致
以上內容又本人經驗所得,沒有參考任何文獻,希望對樓主有所幫助!

Ⅲ 蛋白質測定實驗蛋白質蒸餾過程中為什麼要進行冷凝

使水液化,便於收集

Ⅳ 測飼料蛋白蒸餾時2%硼酸加甲基紅溴甲酚綠混合指示劑後變什麼顏色

是不是指示劑的問題,或者是因為滴定三角瓶未洗干凈

Ⅳ 用凱氏定氮儀蒸餾測蛋白時,加入鹼之後為什麼不變黑而是變成深藍色求解!急需!

那是你加入的加速劑的和鹼反應生成的沉澱的,是正常的

Ⅵ 採用蒸餾法測定蛋白質中n量,產生的氨氣用什麼吸收

採用蒸餾法測定蛋白質中n量,產生的氨氣吸收方法主要有兩種,如下:
第一種回是將氨氣通答到飽和食鹽水即飽和NaCl溶液中,這比直接通入水裡吸收效果要好,因為氨氣在飽和食鹽水裡的溶解度比在水要高,這是利用氨氣易溶於水,即氨氣物理方面的性質;
第二種方法是將氨氣通入到裝有氯化鈣的「U」型管或乾燥管里,這是利用到氨氣可以和氯化鈣反應生成八氨氯化鈣的性質,即氨氣化學方面的性質,因此在乾燥氨氣時不能用氯化鈣做乾燥劑,原因就在此.

Ⅶ 凱氏定氮法測定蛋白質含量蒸餾時為什麼要加入氫氧化鈉溶液

加入氫氧化鈉中和硫酸,使溶液呈鹼性,才能放出氨.混合指示劑在鹼性溶液中呈綠色,可能有氫氧化銅沉澱.還應該有氣泡.不變化就要補加氫氧化鈉

Ⅷ 考馬斯亮藍法測定蛋白質含量實驗中,使用的水一定是蒸餾水嗎為什麼

考馬斯亮藍法測定蛋白質含量實驗中,使用的水最低要求是蒸餾水,更高精度要求可能會使用雙蒸水。

因為Bradford檢測中要用的試劑配製,標准曲線的製作都要用到水。如果不是使用蒸餾水,可能水裡面會有一些游離的離子或者電解質,會影響試劑配製的准確性,干擾實驗結果。而水中殘留的有機物等可能會和考馬斯亮藍發生變色反應,這樣製作的標准曲線會比實際值偏高,導致最終濃度檢測的結果比實際結果偏低。

Ⅸ 國際的測量法,測蛋白質

蛋白質測定的國標規定方法——凱氏定氮法介紹
食品中蛋白質的測定方法

本標准適用於各類食品中蛋白質的測定。
1原理
蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質分解,分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即為蛋白質含量。
2試劑
所有試劑均用不含氨的蒸餾水配製。
2.1硫酸銅。
2.2硫酸鉀。
2.3硫酸。
2.42%硼酸溶液。
2.5混合指示液:1份0.1%甲基紅乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。也可用2份0.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合。
2.640%氫氧化鈉溶液。
2.70.05N硫酸標准溶液或0.05N鹽酸標准溶液。
3儀器
定氮蒸餾裝置:如圖所示。
(圖略)
4操作方法
4.1樣品處理:精密稱取0.2~2.0g固體樣品或2~5g半固體樣品或吸取10~20ml液體樣品(約相當氮30~40mg),移入乾燥的100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸銅,3g硫酸鉀及20ml硫酸,稍搖勻後於瓶口放一小漏斗,將瓶以45°角斜支於有小孔的石棉網上。小心加熱,待內容物全部炭化,泡沫完全停止後,加強火力,並保持瓶內液體微沸,至液體呈藍綠色澄清透明後,再繼續加熱0.5h。取下放冷,小心加20ml水。放冷後,移入100ml容量瓶中,並用少量水洗定氮瓶,洗液並入容量瓶中,再加水至刻度,混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗。
4.2按圖裝好定氮裝置,於水蒸氣發生瓶內裝水至約2/3處,加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入數粒玻璃珠以防暴沸,用調壓器控制,加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。
4.3向接收瓶內加入10ml2%硼酸溶液及混合指示液1滴,並使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0ml樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應室,並以10ml水洗滌小燒杯使流入反應室內,塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將10ml40%氫氧化鈉溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其緩緩流入反應室,立即將玻塞蓋緊,並加水於小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾,開始蒸餾。蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內,蒸餾5min。移動接受瓶,使冷凝管下端離開液面,再蒸餾1min。然後用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以0.05N硫酸或0.05N鹽酸標准溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。
同時吸取10.0ml試劑空白消化液按4.3操作。
4.4計算

式中:X——樣品中蛋白質的含量,%;
V1——樣品消耗硫酸或鹽酸標准液的體積,ml;
V2——試劑空白消耗硫酸或鹽酸標准液的體積,ml;
N——硫酸或鹽酸標准溶液的當量濃度;
0.014——1N硫酸或鹽酸標准溶液1ml相當於氮克數;
m——樣品的質量(體積),g(ml);
F——氮換算為蛋白質的系數。蛋白質中的氮含量一般為15~17.6%,按16%計算乘以6.25即為蛋白質,乳製品為6.38,麵粉為5.70,玉米、高粱為6.24,花生為5.46,米為5.95,大豆及其製品為5.71,肉與肉製品為6.25,大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83,芝麻、向日葵為5.30。

記得採納我的答案哦,祝你學習進步

Ⅹ 凱氏定氮法測定蛋白質時,若在蒸餾過程中,吸收液始終未變為藍綠色,為什麼

蒸餾液中忘加氫氧化鈉了吧

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